Protein purification service
Protein purification is a process of separating a specific protein from a mixture of proteins. It is a critical step in many applications, including research, drug development, and diagnostics.
純化方法 | 原理 | 適用范圍 |
凝膠過濾層 | 根據(jù)分子間的大小或者形狀差異進(jìn)行分離 | 根據(jù)生物活性物質(zhì)與特異性配體間的特異性親和力來達(dá)到分離目的 |
離子交換層析 | 根據(jù)蛋白質(zhì)分子表面靜電荷的差異進(jìn)行分離 | 陽離子交換主要是改變pH,主要應(yīng)用于等電點(diǎn)大于5的蛋白質(zhì);陰離子交換主要是改變鹽濃度,適用于大部分蛋白質(zhì),除雜能力較強(qiáng),對熱源質(zhì)、核酸、外毒素及電荷性有差別的蛋白效果顯著。 |
疏水層 | 根據(jù)蛋白質(zhì)與疏水吸附劑之間的疏水作用差異進(jìn)行分離 | 適用范圍廣,原則上可用于所有蛋白質(zhì)的純化,適合于從大體積中提取低含量的目標(biāo)蛋白,對DNA及小牛血清去除率較高 |
親和層析 | 根據(jù)生物活性物質(zhì)與特異性配體間的特異性親和力來達(dá)到分離目的 | 適用于抗原抗體親和純化,以及一系列標(biāo)簽純化 |
Common protein purification methods
There are many different protein purification methods available. Some of the most common methods include:
Size-exclusion chromatography (SEC): This method separates proteins based on their size.
Ion-exchange chromatography (IEC): This method separates proteins based on their charge.
Hydrophobic interaction chromatography (HIC): This method separates proteins based on their hydrophobicity.
Affinity chromatography (AC): This method separates proteins based on their specific binding to a ligand.
比較項(xiàng)目 | 大小 | 純化原理 | 特點(diǎn) |
HIS Tag | 一般為6-8個組氨酸組合 | 組氨酸殘基上的咪唑基團(tuán)可與層析介質(zhì)中的金屬離子螯合,再通過提高緩沖液中咪唑濃度進(jìn)行競爭性洗脫達(dá)到純化效果 | 標(biāo)簽小,純化簡單; 能與其他標(biāo)簽形成雙標(biāo)簽; 能純化可溶性/包涵體蛋白 |
GST Tag | 26KD | 利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價(jià)親和,通過GSH交換洗脫原理來進(jìn)行純化 | 可溶性標(biāo)簽,提高蛋白表達(dá)的可溶性; 不能應(yīng)用于包涵體等需變形處理的純化 |
Flag Tag | 8個氨基酸 DYKDDDDK | 瓊脂糖上偶聯(lián)有flag抗體,可采用競爭性洗脫或酸性洗脫 | 在真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)效率更高; 可以純化有活性的融合蛋白, |
MBP Tag | 42.5 KD | 多糖樹脂吸附 |
可以減少目標(biāo)蛋白的降解,增加蛋白的表達(dá)量和穩(wěn)定性,提高表達(dá)產(chǎn)物的水溶性,但標(biāo)簽較大, 對蛋白的結(jié)構(gòu)和功能會有一定影響。 適用于包涵體的純化 |
Strep Tag | 8個氨基酸 WSHPQFEK | 生物素(biotin)和抗生物素蛋白鏈菌素(streptavidin)之間的結(jié)合反應(yīng)。 | 純化流程溫和能保持目標(biāo)蛋白活性; 能進(jìn)行變性條件下的純化; 價(jià)格相對HIS Tag而言較高 |
Protein purification services
Our protein purification services are designed to provide you with the highest quality purified proteins. We offer a variety of services to meet your specific needs, including:
Recombinant protein purification
Natural protein purification
Labeled protein purification
Unlabeled protein purification
Insoluble protein purification
天然蛋白純化服務(wù)
項(xiàng)目名稱 | 純化方案 |
天然大分子蛋白分離純化 | 選用適當(dāng)孔徑的分子篩分離純化,配合使用陰、陽離子吸附柱以及HLPC,鑒定并收取相應(yīng)洗脫峰。 |
天然小分子蛋白分離純化 | 多層級分離過濾配合分子篩去除大分子雜質(zhì),結(jié)合使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子蛋白,經(jīng) HPLC和MS鑒定純化。 |
混合未知蛋白樣品分離純化 | 由卡梅德生物制定相應(yīng)方案進(jìn)行分離純化,并經(jīng)質(zhì)譜鑒定、活性鑒定等多種方案確認(rèn)分離產(chǎn)物。 |
重組蛋白純化服務(wù)
項(xiàng)目名稱 | 純化方案 |
重組蛋白脫標(biāo)簽及分離純化 | 商品化親和純化樹脂,如Ni柱,GST-Beads等分離純化帶有6xHis、GST、SUMO、MBP融合蛋白,獲得純度90%以上融合蛋白 |
不含標(biāo)簽的重組蛋白純化 | 抗體親和純化;也可選擇類似于天然蛋白純化方式,依項(xiàng)目而定 |
包涵體變性與復(fù)性純化 | 根據(jù)蛋白質(zhì)不同的性質(zhì),可以選擇尿素、鹽酸胍、去垢劑、極端pH等,以保證最大程度獲得單體狀態(tài)的變性蛋白 |
Service process
步驟 | 服務(wù)內(nèi)容 | 周期 |
Step1:蛋白檢測前與預(yù)實(shí)驗(yàn) | SDS-PAGE檢測蛋白情況; 小體積純化與檢測 | 1-2周 |
Step2:蛋白純化與檢測 | 大量純化; SDS-PAGE; WB檢測(視項(xiàng)目而定); 濃度檢測 | 1-2周 |
交付 | 純化報(bào)告,圖片數(shù)據(jù); 成品蛋白 |
Service advantages
Our protein purification services offer the following advantages:
State-of-the-art equipment: We use the latest equipment to ensure the highest quality purified proteins.
Expert technical support: Our expert technical team will work with you to develop the best purification strategy for your application.
Comprehensive analysis: We provide comprehensive analysis of the purified protein to confirm its purity and quality.