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Protein purification service

    Protein purification is a process of separating a specific protein from a mixture of proteins. It is a critical step in many applications, including research, drug development, and diagnostics.

純化方法

原理

適用范圍

凝膠過濾層

根據(jù)分子間的大小或者形狀差異進(jìn)行分離

根據(jù)生物活性物質(zhì)與特異性配體間的特異性親和力來達(dá)到分離目的

離子交換層析

根據(jù)蛋白質(zhì)分子表面靜電荷的差異進(jìn)行分離

陽離子交換主要是改變pH,主要應(yīng)用于等電點(diǎn)大于5的蛋白質(zhì);陰離子交換主要是改變鹽濃度,適用于大部分蛋白質(zhì),除雜能力較強(qiáng),對熱源質(zhì)、核酸、外毒素及電荷性有差別的蛋白效果顯著。

疏水層

根據(jù)蛋白質(zhì)與疏水吸附劑之間的疏水作用差異進(jìn)行分離

適用范圍廣,原則上可用于所有蛋白質(zhì)的純化,適合于從大體積中提取低含量的目標(biāo)蛋白,對DNA及小牛血清去除率較高

 

親和層析

根據(jù)生物活性物質(zhì)與特異性配體間的特異性親和力來達(dá)到分離目的

適用于抗原抗體親和純化,以及一系列標(biāo)簽純化

 

Common protein purification methods




        There are many different protein purification methods available. Some of the most common methods include:


        Size-exclusion chromatography (SEC): This method separates proteins based on their size.


        Ion-exchange chromatography (IEC): This method separates proteins based on their charge.


        Hydrophobic interaction chromatography (HIC): This method separates proteins based on their hydrophobicity.


        Affinity chromatography (AC): This method separates proteins based on their specific binding to a ligand.



比較項(xiàng)目

大小

純化原理

特點(diǎn)

HIS Tag

一般為6-8個組氨酸組合

組氨酸殘基上的咪唑基團(tuán)可與層析介質(zhì)中的金屬離子螯合,再通過提高緩沖液中咪唑濃度進(jìn)行競爭性洗脫達(dá)到純化效果

標(biāo)簽小,純化簡單;

能與其他標(biāo)簽形成雙標(biāo)簽;

能純化可溶性/包涵體蛋白

GST Tag

26KD

利用GST融合蛋白與固定的谷胱甘肽(GSH)通過硫鍵共價(jià)親和,通過GSH交換洗脫原理來進(jìn)行純化

可溶性標(biāo)簽,提高蛋白表達(dá)的可溶性;

不能應(yīng)用于包涵體等需變形處理的純化

Flag Tag

8個氨基酸

DYKDDDDK

瓊脂糖上偶聯(lián)有flag抗體,可采用競爭性洗脫或酸性洗脫

在真核表達(dá)系統(tǒng)中表達(dá)效率更高;

可以純化有活性的融合蛋白,

 

MBP Tag

42.5 KD

 多糖樹脂吸附

 

可以減少目標(biāo)蛋白的降解,增加蛋白的表達(dá)量和穩(wěn)定性,提高表達(dá)產(chǎn)物的水溶性,但標(biāo)簽較大,

對蛋白的結(jié)構(gòu)和功能會有一定影響。

適用于包涵體的純化

Strep Tag

8個氨基酸

WSHPQFEK

生物素(biotin)和抗生物素蛋白鏈菌素(streptavidin)之間的結(jié)合反應(yīng)。

純化流程溫和能保持目標(biāo)蛋白活性;

能進(jìn)行變性條件下的純化;

價(jià)格相對HIS Tag而言較高

 

 

Protein purification services



        Our protein purification services are designed to provide you with the highest quality purified proteins. We offer a variety of services to meet your specific needs, including:


        Recombinant protein purification


        Natural protein purification


        Labeled protein purification


        Unlabeled protein purification


        Insoluble protein purification



天然蛋白純化服務(wù)

 

項(xiàng)目名稱

純化方案                                

天然大分子蛋白分離純化

選用適當(dāng)孔徑的分子篩分離純化,配合使用陰、陽離子吸附柱以及HLPC,鑒定并收取相應(yīng)洗脫峰。

天然小分子蛋白分離純化

多層級分離過濾配合分子篩去除大分子雜質(zhì),結(jié)合使用大孔樹脂或反向樹脂純化小分子蛋白,經(jīng) HPLCMS鑒定純化。

混合未知蛋白樣品分離純化

由卡梅德生物制定相應(yīng)方案進(jìn)行分離純化,并經(jīng)質(zhì)譜鑒定、活性鑒定等多種方案確認(rèn)分離產(chǎn)物。                       

 

重組蛋白純化服務(wù)


項(xiàng)目名稱

純化方案

重組蛋白脫標(biāo)簽及分離純化

商品化親和純化樹脂,如Ni柱,GST-Beads等分離純化帶有6xHis、GST、SUMOMBP融合蛋白,獲得純度90%以上融合蛋白

不含標(biāo)簽的重組蛋白純化

抗體親和純化;也可選擇類似于天然蛋白純化方式,依項(xiàng)目而定

包涵體變性與復(fù)性純化

根據(jù)蛋白質(zhì)不同的性質(zhì),可以選擇尿素、鹽酸胍、去垢劑、極端pH等,以保證最大程度獲得單體狀態(tài)的變性蛋白


 

Service process



步驟

服務(wù)內(nèi)容

周期

Step1:蛋白檢測前與預(yù)實(shí)驗(yàn)

SDS-PAGE檢測蛋白情況;

小體積純化與檢測

1-2

 

Step2:蛋白純化與檢測

大量純化;

SDS-PAGE

WB檢測(視項(xiàng)目而定);

濃度檢測

1-2

交付

純化報(bào)告,圖片數(shù)據(jù);

成品蛋白

 

Service advantages



        Our protein purification services offer the following advantages:


        State-of-the-art equipment: We use the latest equipment to ensure the highest quality purified proteins.


        Expert technical support: Our expert technical team will work with you to develop the best purification strategy for your application.


        Comprehensive analysis: We provide comprehensive analysis of the purified protein to confirm its purity and quality.



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