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siRNA 合成

服務(wù)介紹 Service Introduction



         siRNA 是19~23 nt 的雙鏈RNA小分子,這種小分子在細(xì)胞中首先被一種稱為 Dicer 的 RNA 酶切割,隨后與細(xì)胞中的某些酶和蛋白質(zhì)形成 RNA 誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISCs),進(jìn)而解開(kāi)雙鏈并通過(guò)反義鏈與細(xì)胞內(nèi) mRNA 分子發(fā)生特異性結(jié)合,導(dǎo)致 mRNA 分子降解,從而抑制特定基因的表達(dá)。siRNA合成是機(jī)體或細(xì)胞實(shí)現(xiàn)基因沉默最為簡(jiǎn)捷的方法,成本低、轉(zhuǎn)染效率高,也是RNAi臨床治療的最佳手段,在藥物開(kāi)發(fā)方面具有不可替代的優(yōu)勢(shì)。

圖片1 

基因沉默機(jī)制

 

常規(guī)siRNA



       常規(guī)化學(xué)合成 siRNA 雙鏈,特異性靶點(diǎn)設(shè)計(jì),覆蓋人、小鼠、大鼠全基因組的所有基因,適合進(jìn)行各種細(xì)胞 RNAi 實(shí)驗(yàn)。

           -- 采用siCatch? siRNA design智能設(shè)計(jì);

        -- 通過(guò)系統(tǒng)性優(yōu)化,保證靶點(diǎn)特異性;

        -- 均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的質(zhì)譜檢測(cè),保證siRNA質(zhì)量和純度;

 

對(duì)照siRNA



       siRNA對(duì)照是完整RNAi實(shí)驗(yàn)的重要組成部分,主要包括:轉(zhuǎn)染對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照、空白對(duì)照。這些對(duì)照產(chǎn)品將幫助研究人員進(jìn)行siRNA轉(zhuǎn)染條件優(yōu)化,驗(yàn)證基因沉默實(shí)驗(yàn)流程準(zhǔn)確性,對(duì)siRNA誘導(dǎo)的基因沉默效果進(jìn)行特異性分析,保證RNAi實(shí)驗(yàn)的順利完成。

圖片2 

 

   --陰性對(duì)照:不靶向任何已知的人、小鼠、大鼠基因;無(wú)任何化學(xué)修飾;

   --陽(yáng)性對(duì)照:提供以內(nèi)源基因 ( 如 GAPDH,ACTB,P65 等基因 ) 為靶基因的陽(yáng)性對(duì)照 siRNA,這些 siRNA 經(jīng)特異性設(shè)計(jì)及驗(yàn)證;

   --轉(zhuǎn)染對(duì)照:提供Cy3熒光標(biāo)記的轉(zhuǎn)染對(duì)照siRNA,無(wú)化學(xué)修飾,可與實(shí)驗(yàn)中的靶基因siRNA共同轉(zhuǎn)染而觀察轉(zhuǎn)染效率。該對(duì)照熒光強(qiáng)度高,具有一定的抗淬滅性能,尤其適合細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中的轉(zhuǎn)染效率檢測(cè),可采用熒光顯微鏡,共聚焦顯微鏡,流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)。

 

化學(xué)修飾siRNA



         RNA化學(xué)修飾可顯著改變寡核酸理化性質(zhì),進(jìn)而影響寡核酸的功能,有利于深入研究寡核酸功能。

       各類修飾寡核酸,包括各種末端標(biāo)記和中間修飾,常見(jiàn)修飾方式為:硫代磷酸骨架,2’-O- 甲基化,2’-O- 氟代,膽固醇,Cy3 和 Cy5 標(biāo)記,生物素,氨基,DNP,炔基修飾等。


 

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