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        本試劑盒利用Picogreen DNA染料能夠特異性結(jié)合雙鏈DNA，而不與蛋白質(zhì)、RNA、鹽離子結(jié)合的原理，通過(guò)激發(fā)光照射，Qubit檢測(cè)儀收集發(fā)射光，特異的分析樣品中雙鏈DNA的實(shí)際含量，能夠排除樣品中蛋白質(zhì)、RNA、鹽離子等物質(zhì)的干擾，從而對(duì)雙鏈DNA進(jìn)行精準(zhǔn)的定量。

        Nanodrop系列微量分光光度計(jì)采用目前最常見(jiàn)的紫外吸光法對(duì)待測(cè)樣品的濃度及純度進(jìn)行檢測(cè)，由于它會(huì)檢測(cè)吸光度在260nm處所有物質(zhì)的吸光值（如DNA、RNA、降解核酸和游離核苷酸等其他雜質(zhì)），因此讀數(shù)并不是十分準(zhǔn)確。而熒光計(jì)通過(guò)熒光染料與特定目標(biāo)分子結(jié)合后，檢測(cè)其熒光強(qiáng)度來(lái)測(cè)目標(biāo)分子的濃度，因此其定量結(jié)果一般低于A260nm處的讀數(shù)，但是更為準(zhǔn)確。

        另外，準(zhǔn)確的DNA定量對(duì)于許多后續(xù)應(yīng)用而言都至關(guān)重要。 Nanodrop系列全波長(zhǎng)微量分光光度計(jì)無(wú)法精確測(cè)定5ng/ul以下的DNA濃度，然而，許多DNA樣品又恰在這個(gè)范圍之內(nèi)。在檢測(cè)雙鏈DNA時(shí)，熒光計(jì)的檢測(cè)極限可達(dá)0.5pg/ul。此時(shí)，更為靈敏的熒光計(jì)似乎是個(gè)更好的選擇。 熒光計(jì)和相應(yīng)的定量試劑盒，能快速靈敏、精確測(cè)定DNA的濃度。

        本試劑將被用于成本昂貴的下游實(shí)驗(yàn):qPCR 、PCR克隆、轉(zhuǎn)染和新一代測(cè)序等精密測(cè)定的實(shí)驗(yàn)，精準(zhǔn)定量范圍10 pg /μL至100ng/μL。

圖1.與Thermofisher (Cat.no.Q32854)測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)品與樣品結(jié)果比較

圖2. 測(cè)試標(biāo)準(zhǔn)品及樣品的穩(wěn)定性

        分別用Q32854與Ipure HS dsDNA assay kit對(duì)準(zhǔn)品和三個(gè)樣品進(jìn)行測(cè)試，結(jié)果如圖1. 高度的一致性，說(shuō)明可以完全取代Q32854的檢測(cè)；用Ipure dsDNA  assay kit 對(duì)樣品和標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行測(cè)量，放置2個(gè)小時(shí)后重新測(cè)量，結(jié)果如圖2.說(shuō)明書Ipure HS ds DNA assay kit 高度的穩(wěn)定性。

        將Ipure HS dsDNA assay kit儲(chǔ)存室溫、4℃、37℃烘烤，評(píng)估了1天、3天、7天、1個(gè)月。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示測(cè)量樣品時(shí)無(wú)明顯差異，說(shuō)明試劑穩(wěn)定性好。