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腺相關病毒AAV包裝

服務介紹  Service Introduction



        腺相關病毒 (Adeno-associated Virus,AAV) 屬于細小病毒科(parvoviridae)單鏈 DNA 病毒。AAV 能感染多種細胞。是目前基因治療首先的工具。

       AAV 是一種復制缺陷型微小病毒,通常需要在輔助病毒(如腺病毒、單純皰疹病毒等)的輔助下才能發(fā)生毒性感染,生成子代 AAV。艾基生物采用 AAV 無輔助病毒系統(tǒng) (AAV Helper-Free System),在無輔助病毒的條件下生產(chǎn)重組腺相關病毒。在這個系統(tǒng)中, rep 和 cap 基因從病毒載體中被轉(zhuǎn)移到輔助質(zhì)粒 pAAV-RC 中,而 AAV ITRs 仍位于病毒載體中。生產(chǎn) AAV 病毒顆粒所需的腺病毒基因 產(chǎn)物(包括 E2A,E4 等基因)大部分則由 pHelper 質(zhì)粒提供,其余的腺病毒基因產(chǎn)物由穩(wěn)定表達腺病毒 E1 基因的宿主細胞提供。在輔 助質(zhì)粒的幫助下,僅需兩端的 ITR 就能將攜帶的外源片段包裝進入腺相關病毒顆粒,因此,rep 和 cap 基因的轉(zhuǎn)移后空出的位置可以允許 外源基因插入病毒基因組中。(AAV基因組如下圖)

圖片11 

 

服務優(yōu)勢 Service Advantages


 

   安全性高:重組腺相關病毒載體 (rAAV) 源于非致病的野生型腺相關病毒。迄今為止尚未發(fā)現(xiàn)對人體致病的野生型 AAV,重組 AAV 在基 因組序列上去除了大部分的野生型AAV 基因組元件,進一步保證了安全性。

   免疫原性低:進行動物實驗時造成的免疫反應小。

   宿主范圍廣:能感染分裂細胞和非分裂細胞

   表達穩(wěn)定:能介導外源基因體內(nèi)長時間穩(wěn)定表達。

   物理性質(zhì)穩(wěn)定:可抗氯仿,在 60℃不能被滅活。

 

 

提供的服務 Services


 

      AAV 載體構(gòu)建;

      干擾腺相關病毒(shRNA 和 miRNA)包裝;

      過表達腺相關病毒的包裝。


 

提供產(chǎn)品



產(chǎn)品名稱


病毒滴度(vg/ml)

規(guī)格

對照組

周期

過表達腺相關病毒

過表達腺相關病毒(<1.5k)

1010-1012 

1mL

200uL(1010-1012 vg/ml )

4-5周

過表達腺相關病毒(>1.5k)

1010-1012 

1mL

200uL(1010-1012 vg/ml )

4-5周

干擾腺相關病毒


1010-1012 

1mL

200uL(1010-1012 vg/ml )

4-5周

 

 

 

技術流程  Technical Procedures



 圖片12

 

 

Tips


AAV 病毒載體不同血清型】

       研究發(fā)現(xiàn) AAV 具有多種血清型,各種不同血清型的 AAV 載體的主要區(qū)別是衣殼蛋白不同。AAV 進入細胞前,首先要通過衣殼蛋白 與細胞表面的相應受體結(jié)合進而附著于細胞表面,隨后再通過與其它復合受體的相互作用來啟始病毒顆粒的細胞內(nèi)轉(zhuǎn)運等生物學活動。因 此 AAV 不同血清型對不同的組織和細胞親和性不同,體現(xiàn)出 AAV 血清型對不同組織器官的轉(zhuǎn)染效率存在差異。目前 AAV 可分為 12 種血 清型 AAV1-AAV12。艾基生物可針對不同的組織器官類型選擇相應血清型的 AAV 病毒進行包裝。

 

不同血清型對各組織器官的親和性

組織

最適血清型

中樞組織

AAV1,AAV2,AAV4,AAV5,AAV8,AAV9

心臟

AAV1,AAV8,AAV9

腎臟

AAV2

肝臟

AAV7,AAV8,AAV9

AAV4,AAV5,AAV6,AAV9

胰臟

AAV8

骨骼肌

AAV1,AAV6,AAV7,AAV8,AAV9

感光受體細胞

AAV2,AAV5,AAV8

視網(wǎng)膜色素細胞

AAV1,AAV2,AAV4,AAV5,AAV8

 


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