sgRNA合成

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       sgRNA為體外合成的高純度RNA，可與Cas9蛋白質(zhì)結(jié)合形成復合物，通過電轉(zhuǎn)、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、顯微注射等方式導入細胞，以核定位信號肽NLS進入細胞核，進行基因編輯。

　　相對于其它導入編輯元件的方式，導入Cas9/sgRNA復合物的基因編輯方式具有幾個重要優(yōu)點：1.所有元件都是成熟形態(tài)，不需經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯，因此沒有密碼子不兼容、轉(zhuǎn)錄受調(diào)控、轉(zhuǎn)錄效率低下等問題，適用于各種生物的各種細胞，包括干細胞、受精卵，最大程度保證編輯的成功。2.編輯元件沒有整合進入基因組的風險，Cas9和sgRNA都是細胞可代謝的，最終將代謝消失，不留痕跡。在需要進行動物試驗或臨床試驗的場合，這一點尤為重要。同樣，若需進行多輪編輯/篩選，這一點也很關(guān)鍵。3.導入Cas9/sgRNA復合物具有更高的編輯專一性。4.方便、高效。確定靶向序列后，3個工作日即可完成Cas9/sgRNA復合物的準備，而且可以高通量平行，也可以進行臨床規(guī)模的大量制備。

　　請指定靶向DNA序列的20個堿基，艾基生物提供對應的sgRNA。sgRNA合成采用體外轉(zhuǎn)錄法，具有生物相容性好、純度高、活性高的優(yōu)點，并且可以擴大到g級合成。一次反應可獲得>100ug sgRNA。合成周期3個工作日。

　　艾基生物的sgRNA訂制合成專為高要求的基礎(chǔ)研究及臨床轉(zhuǎn)化而設(shè)計，具有超低的內(nèi)毒素含量(達到人注射用標準)，是進行科研及臨床應用開發(fā)的最佳試劑。sgRNA為RNase-free水溶制劑，由于RNA易降解，須在-80℃儲存。使用時必須嚴格按照操作RNA的要求進行操作。本試劑為無菌、RNase-free、DNase-free試劑，可直接用于細胞培養(yǎng)或動物試驗。

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