服務(wù)介紹 Service Introduction
細菌的 rRNA 是細胞內(nèi)含量最多的 RNA,約占 RNA 總量的 80% 以上,由高度保守區(qū)和可變區(qū)組成。
細菌的 rRNA 包括 5S、 16S、 23S,其中 5S rRNA 信息量少,不適合分析。23S rRNA 盡管分子大,信息量多,但堿基突變速度較快,同樣不適用于細菌鑒定。16S rDNA 是編碼原核生物核糖體小亞基 16S rRNA的 DNA 序列,相比之下遺傳較為穩(wěn)定,長度在 1550±200 bp 左右,信息量適中,可以用于研究系統(tǒng)進化。目前已經(jīng)報道了 10,000 種以上的細菌 16S rDNA 序列。 16S測序是細菌菌種鑒定的金標(biāo)準(zhǔn)。
技術(shù)流程 Technical Procedures
16s rDNA 示意圖
樣品要求及注意事項 Sample Requirements And Notes
基因組 DNA:OD 260/280 在 1.8-2.0 之間(OD260/230 最好大于 1.5),濃度 ≥ 30 ng/μl, 體積 ≥ 20 μl,且無明顯降解;
建議提供培養(yǎng)過的菌液,體積 >2 ml,請確保提供的菌液是經(jīng)過分離培養(yǎng)的單菌落,因樣本不純造成的測序雙峰,將全額收取實驗費用;
特殊樣品 , 如放線菌、厭氧菌等,請直接提供基因組 DNA,革蘭氏陽性菌,建議提供基因組 DNA;
不接受有致病性的樣品 , 如果菌體帶有致病性,請?zhí)峁┗蚪M DNA,并進行加熱處理以殺死致病菌;
由于有些真菌形態(tài)與細菌相似,難以判斷,在無法獲得 16S rDNA 結(jié)果時,建議考慮進行真菌 ITS 區(qū)序列分析;
對于測序雙峰的樣本,可以提供克隆測序的服務(wù)。
交付結(jié)果 Results Delivery
測序峰圖及序列文件
16S rDNA 序列拼接文件
序列分析比對結(jié)果
增資服務(wù) Additional Service
對于測序雙峰的樣品,可提供克隆測序服務(wù),價格:380 元 / 樣品; 包含:片段克隆,6 個陽性克隆測序,序列比對分析。
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