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腺病毒（AV）包裝

服務(wù)介紹 Service Introduction

腺病毒（Adenovirus）是目前最高效可靠的重組病毒表達(dá)系統(tǒng)之一，可用于在哺乳細(xì)胞中瞬時(shí)高效地表達(dá)目的基因。具備宿主范圍廣，感染效率高；可以有效增殖，病毒滴度高；不整合到宿主基因組中，生物安全性高等特點(diǎn)。適用于動(dòng)物水平的實(shí)驗(yàn)或者是某些極其難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞。

艾基生物采用AdMAX ?的系統(tǒng)構(gòu)建重組腺病毒。首先通過穿梭質(zhì)粒和骨架質(zhì)粒原核重組的方法生產(chǎn)腺病毒載體，然后在293A細(xì)胞中進(jìn)一步包裝及擴(kuò)增以獲取高滴度重組腺毒。

服務(wù)優(yōu)勢 Service Advantages

專業(yè)的載體構(gòu)建服務(wù)：多樣的穿梭載體，滿足不同客戶需求，依托自有分子克隆平臺(tái)，服務(wù)更專業(yè)。

標(biāo)準(zhǔn)的腺病毒包裝流程：病毒滴度高，周期短，安全性好。

貼心的一站式服務(wù)：從載體設(shè)計(jì)，構(gòu)建合成，測序鑒定等到病毒包裝，濃縮和滴度測定等均由本公司專業(yè)團(tuán)隊(duì)完成。

提供的服務(wù) Services

●　常規(guī)基因過表達(dá)/干擾腺病毒包裝

● circRNA /LncRNA過表達(dá)和干擾腺病毒包裝

● 腺病毒現(xiàn)貨

技術(shù)流程 Technical Procedures

艾基腺病毒系統(tǒng)組成

1、一個(gè)表達(dá)載體，含有目的基因、目的基因的啟動(dòng)子以及一些把這個(gè)載體包裝進(jìn)病毒的元件；

2、一個(gè)輔助質(zhì)粒；

3、293A 細(xì)胞株，能夠在表達(dá)載體轉(zhuǎn)染后包裝出腺病毒。

定制病毒產(chǎn)品

注：

1）該周期不包含載體構(gòu)建部分，實(shí)驗(yàn)分析后給出整體的實(shí)驗(yàn)方案、報(bào)價(jià)及周期;

2）若客戶提供腺病毒載體，需要提供對應(yīng)的質(zhì)粒圖譜，以便質(zhì)粒質(zhì)檢；請嚴(yán)格按照我們的質(zhì)粒提供需求寄送載體給我們，相關(guān)的項(xiàng)目材料均需經(jīng)過QC檢測，每一份材料則需要附加檢測費(fèi)用；客戶提供物品接收并通過QC之后生產(chǎn)才正式開始項(xiàng)目。

定制病毒產(chǎn)品

注：

1）對照病毒的交付周期為合同簽訂1周內(nèi)發(fā)貨；

2）腺病毒存儲(chǔ)在HBSS緩沖液中，并采用干冰運(yùn)輸。

病毒產(chǎn)品質(zhì)量保證

（1）滴度測定：腺病毒滴度是通過TCID50的方法進(jìn)行檢測。腺病毒通過梯度稀釋，然后感染293A細(xì)胞，每個(gè)梯度個(gè)10孔，之后經(jīng)過8-10天觀察各孔CPE現(xiàn)象，以出現(xiàn)CPE孔為陽性，未出現(xiàn)孔為陰性進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，結(jié)果按Reed-Muench兩氏法計(jì)算。注：

1）相同細(xì)胞類型在不同轉(zhuǎn)染條件下，相同病毒液的轉(zhuǎn)染效率可以相差2-5倍。不同細(xì)胞類型之間可能差異會(huì)更大；

2）需要qpcr滴度驗(yàn)證結(jié)果需要提前說明，一般交付不含qpcr檢測數(shù)據(jù)。

（2）無菌檢測：病毒儲(chǔ)液接種培養(yǎng)基已檢測細(xì)菌和真菌的生長。

案列展示

Fig1.MOI為1的條件，293T細(xì)胞被感染的效果