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DNA雙鏈斷裂 (DNA double-strand break, DSB) 是一種常見且高度有害的DNA損傷形式，嚴重威脅著基因組穩(wěn)定性和細胞存活。DSB修復缺陷或失調(diào)與腫瘤、衰老以及免疫缺陷等密切相關。非同源末端連接（Non-homolouous end joining, NHEJ）和同源重組（Homologous recombination, HR）是DSB修復的兩條主要通路。一般地，HR被認為是DNA高保真的修復方式，但在特定情況下，如對于富含重復序列的異染色質(zhì)來說，HR修復則容易造成非等位基因間的同源重組（non-allelic homologou…

【01】做瞬轉可以復蘇細胞的時候直接加質(zhì)粒嗎？ 不可以，轉染是通過物理或化學方法將外源 DNA轉入細胞的過程，磷酸鈣轉染法和脂質(zhì)體轉染法為例，兩種方法都需要在轉染24h 前進行細胞傳代，且細胞密度達到70%-80%方可進行轉染實驗。而細胞復蘇后， 細胞未達到最佳的狀態(tài)，活力為完全恢復，細胞密度未達到要求，故而不可用復蘇細胞直接加質(zhì)粒進行實驗。【02】細胞密度（%匯合度）會影響轉染效率嗎？ 是的，細胞密度會影響轉染性能。細胞匯合度在 70-90％時具…

在研究基因轉錄調(diào)控的過程中，大家經(jīng)常看到構建某個基因啟動子的熒光素酶報告質(zhì)?；蛘哳A測與某基因啟動子結合的轉錄因子，無論哪種，首先得查找到某基因的啟動子序列。 能查到啟動子序列的網(wǎng)站很多，pubmed，ensemble，UCSC 等等，那我們給大家介紹一下比較簡單容易上手的查找方式，例如非常強大的NCBI數(shù)據(jù)庫如何查找啟動子的詳細介紹，而promoter和TF的結合通過什么網(wǎng)站預測的呢？基因啟動子序列查找步驟1.打開NCBI https://www.ncbi.nlm.nih.gov/進入首頁?…

1.什么是細胞系鑒定？ 所謂細胞系鑒定即通過 STR（短串聯(lián)重復）圖譜所建立細胞系的遺傳特征。一株細胞系的遺傳特征確立后，細胞系可以通過定期的檢測，以防止出現(xiàn)細胞系被誤認或交叉污染的情況。2.為什么要進行細胞系鑒定？ 首先進行細胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細胞來進行，這些細胞可能是受贈于其它研究人員,也可能是從細胞庫(如美國?ATCC,American?Type?Culture?Collection)得來。據(jù)估計，15-20%的實驗室，實驗中所使用的細胞…

導 讀 /Guide Reading新買到的細胞，實驗室傳了幾代的細胞，又或者儲存于超低溫冰箱幾年不用的細胞，被污染了么？鑒定正確么？用它做研究會影響實驗結果么？沒有經(jīng)過相應的細胞鑒定，使用了被污染的細胞，經(jīng)過大量的實驗，寫出一篇論文，但是結論被推翻，論文被召回，大量的時間、物力和人力被浪費，一切都要從頭再來。背景應用于生物醫(yī)學研究領域的哺乳動物細胞被錯誤鑒定和交叉污染的問題，一直是一個普遍存在的突出問題。據(jù)統(tǒng)計，國外實驗室有20%左右的細胞株被錯誤…

適用樣本類型小鼠細胞沉淀，小鼠細胞懸液，小鼠細胞基因組檢測位點18-3、9-2、6-7、5-5、X-1、15-3、12-1、6-4、4-2。（9個小鼠細胞STR分型檢測位點。）vWA，CSF1PO（2個人源細胞STR分型檢測位點。）實驗周期 3-5個工作日檢測范圍是否為小鼠細胞是否存在小鼠物種內(nèi)的交叉污染是否存在人源細胞污染對已公布STR數(shù)據(jù)的小鼠細胞進行小鼠細胞株鑒定報告類型提供中英文報告STR分型圖譜

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(MSI)微衛(wèi)星(Microsatellite)是遍布于人類基因組中的短串聯(lián)重復序列。與正常組織相比，腫瘤組織的微衛(wèi)星由于重復單位的插入或缺失而導致微衛(wèi)星長度的改變，就叫做微衛(wèi)星不穩(wěn)定性(Microsatellite Instability，MSI)。大量研究表明，MSI是由錯配修復(MMR)基因發(fā)生缺陷引起的，與腫瘤的發(fā)生密切相關。臨床上已將MSI作為結直腸癌預后和制定輔助治療方案的重要分子標志物，并應用于協(xié)助Lynch綜合征篩查。適應領域① PD-1用藥指導② II期結直腸癌的用藥指導和預后預測…