Ipure FFPE Nucleic Acid Kits 采用硅膠純化技術(shù),適用于從石蠟包埋組織樣品中提取高純度的總DNA或總RNA。石蠟包埋組織經(jīng)二甲苯脫蠟或脫蠟液處理后,經(jīng)蛋白酶K消化,加入結(jié)合液和乙醇調(diào)節(jié)結(jié)合條件,轉(zhuǎn)移至硅膠膜上,硅膠膜特異性的結(jié)合DNA& RNA,而蛋白質(zhì)、雜質(zhì)不被吸附而去除,經(jīng)過兩次的去蛋白、去離子的處理后,用Elution Buffer/DEPC水洗脫總RNA&DNA。
1.從人扁桃體石蠟切片中提取DNA及PCR擴(kuò)增
從中山大學(xué)第三附屬醫(yī)院病理科得到的病人的扁桃體石蠟樣本切片中提取得到DNA,使用KRAS基因的引物擴(kuò)增107bp、226bp的片段,和HBB基因488bp的片段,在1%的瓊脂糖凝膠上電泳30min,如圖1所示。
2. 從小鼠睪丸石蠟樣本提取核酸DNA。
華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)院(動(dòng)物病理科研組)從小鼠睪丸的石蠟樣本中提取得到DNA,設(shè)計(jì)管家基因GAPDH擴(kuò)增218bp和440bp的目的片段,對(duì)得到的PCR產(chǎn)物進(jìn)行電泳。如圖2.
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