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技術支持

致力于引進國外先進技術,為廣大科研工作者和醫(yī)療機構提供高質(zhì)量 的科研技術支持 。

樣品制備指南

sanger測序樣品

樣品制備指南


DNA類型

DNA長度(包括長度)

模板濃度

模板總量

質(zhì)粒

 < 6 kb

~50 ng/uL

~500 ng

 6 kb~10 kb

~80 ng/uL

~800 ng

 10 kb

~100 ng/uL

~1000 ng

已純化PCR產(chǎn)物

<500 bp

~1 ng/uL


未純化PCR產(chǎn)物

原液總體積不少于20uL

菌液

直接提?。?/span>2-4 mL已過夜培養(yǎng)的菌液

需擴大培養(yǎng):>200 uL新鮮菌液

菌板

提供菌板注意菌落不能太過密集,標記需挑取的菌落

測序引物

≥5 pmol/uL(5uM)

≥10 ul



備注:

        提供菌液,請注明抗生素類型,常備抗生素:氨芐青霉素(Amp),卡那霉素(Kan),氯霉素(Chl)等等,若需接非常用抗生素,如博來霉素,建議提供樣品時能一并提供相應抗生素。   

        PCR產(chǎn)物,如果片段小于100bp,建議克隆后測序;注明條帶大小,條帶是否單一   ;

        測序引物長度盡量控制在20-30bp,引物過短或過長均會影響測序質(zhì)量  ;

        提供的DNA樣品用去離子水或者雙蒸水溶解,不用TE緩沖液溶解。




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