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        采用硅膠柱純化方式從細菌中提取高純的DNA或RNA

        iPure Bacterial DNA&RNA Kits 采用硅膠柱純化方式，適合于從細菌培養(yǎng)液或其它樣品中快速抽提高純度的細菌DNA或RNA，操作者可以在60min完成多個樣品的提取工作。

        從革蘭氏陽性菌中提取基因組DNA的實驗例：

        使用本試劑盒從從革蘭氏陽性菌中提取基因組DNA，最終分別從白色念珠菌、金黃色葡萄球菌中純化得到了高純度基因組DNA，其電泳結(jié)果見圖。

        注：2%瓊脂糖凝膠電泳圖；M：DL 5000 Maker（TaKaRa）；1.白色念珠菌菌基因組DNA；2.金黃色葡萄球菌基因組DNA

         從革蘭氏陰性菌中提取基因組DNA的實驗例：

        使用本試劑盒從革蘭氏陰性菌中提取基因組DNA，最終分別從大腸桿菌、肺炎克雷伯菌中純化得到了高純度基因組DNA，其電泳結(jié)果見圖。

        注：2%瓊脂糖凝膠電泳圖；M：DL 5000 Maker（TaKaRa）；1.大腸桿菌基因組DNA；2.肺炎克雷伯菌基因組DNA

         iPure Bacteria DNA&RNA M.tuberculosis Kits（離心柱法）       

        結(jié)核分枝桿菌DNA&RNA提取試劑盒是一款專門為艱難裂解的細菌（如：葡萄球菌、糞腸球菌、結(jié)核分枝桿菌）而設(shè)計的純化試劑，試劑盒中配有二氧化鋯磁珠，通過磁珠5~10分鐘的斡旋震蕩，可以將較難裂解的細胞壁破壞，短暫離心后的液體通過溶菌酶的作用，能夠得到高質(zhì)量的DNA，用于后續(xù)的分子生物學(xué)分析，廣泛適用于結(jié)核分枝桿菌的DNA診斷研究。

圖中為重復(fù)20次提取分枝桿菌108，106，104CFU/ml，進行熒光定量PCR測試的結(jié)果

        結(jié)核分枝桿菌

        結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)，俗稱結(jié)核桿菌，是引起結(jié)核病的病原菌?？汕址溉砀髌鞴?，但以肺結(jié)核為最多見。結(jié)核病至今仍為重要的傳染病。據(jù)WHO報道，每年約有800萬新病例發(fā)生，至少有300萬人死于該病。我國建國前死亡率達200-300人/10萬，居各種疾病死亡原因之首，建國后人民生活水平提高，衛(wèi)生狀態(tài)改善，特別是開展了群防群治，兒童普遍接種卡介苗，結(jié)核病的發(fā)病率和死亡率大為降低。但應(yīng)注意，世界上有些地區(qū)因艾滋病、吸毒、免疫抑制劑的應(yīng)用、酗酒和貧困等原因，發(fā)病率又有上升趨勢。

        細胞壁結(jié)構(gòu)

        桿菌屬的細菌細胞壁脂質(zhì)含量較高，約占干重的60%，特別是有大量分枝菌酸(mycolicacid)包圍在肽聚糖層的外面，可影響染料的穿入。分枝桿菌一般用齊尼（Ziehl-Neelsen)抗酸染色法，以5%石炭酸復(fù)紅加溫染色后可以染上，但用3%鹽酸乙醇不易脫色。若再加用美藍復(fù)染，則分枝桿菌呈紅色，而其他細菌和背景中的物質(zhì)為藍色。 發(fā)現(xiàn)結(jié)核分枝桿菌在細胞壁外尚有一層莢膜。一般因制片時遭受破壞而不易看到。若在制備電鏡標(biāo)本固定前用明膠處理，可防止莢膜脫水收縮。在電鏡下可看到菌體外有一層較厚的透明區(qū)，即莢膜，莢膜對結(jié)核分枝桿菌有一定的保護作用。

        iPure Bacterial DNA&RNA Magic Beads Kits (磁珠法）  

        Magic beads Kit 是一款能夠適用于大量樣本提取的試劑盒，該試劑盒采用溶菌酶裂解細菌細胞壁，然后通過高濃度胍鹽裂解細胞，通過高分散的硅羥基磁珠和細菌DNA結(jié)合，通過移動磁珠，洗滌蛋白，最終達到分離核酸的目的；平均每個樣品的時間小于5分鐘。