服務(wù)介紹 Service Introduction
擴(kuò)增子測(cè)序主要通過對(duì)特定長(zhǎng)度的 PCR 產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序分析,細(xì)菌的16S rRNA基因和真菌的ITS基因結(jié)構(gòu)既具有保守性,又具有高變性。通過測(cè)序結(jié)果與數(shù)據(jù)庫(kù)比較,可以分析環(huán)境細(xì)菌/真菌的菌群結(jié)構(gòu)和多樣性。針對(duì)環(huán)境樣本,16S/18S/ITS 等基因擴(kuò)增子測(cè)序是研究環(huán)境微生物多樣 性及群落組成差異的重要技術(shù)手段之一。
提供的服務(wù) Services
根據(jù)不同的研究目的和需求,我們提供 3 種擴(kuò)增子產(chǎn)品:16S rDNA 測(cè)序、ITS 測(cè)序及目標(biāo)區(qū)域擴(kuò)增子測(cè)序。具體介紹如下:
1、16S rDNA 測(cè)序:16S rDNA 為編碼原核生物核糖體小亞基 rRNA 的 DNA 序列, 具有 10 個(gè)保守區(qū)域和 9 個(gè)高變區(qū)域(V1-V9),其中保守區(qū)在細(xì)菌間差異不大,高變區(qū)具有屬或種的特異性,對(duì) 16S rDNA 某個(gè)高變區(qū)進(jìn)行測(cè)序,用于研究環(huán)境微生物中細(xì)菌或古菌的群 落結(jié)構(gòu)多樣性。
2、ITS 測(cè)序:ITS 分為兩個(gè)區(qū)域:ITS1 和 ITS2,ITS1 位于真核生物 rDNA 序列 18S 和 5.8S 之間,ITS2 位于真核生物 rDNA 序列 5.8S 和 28S 之間。對(duì) ITS1或 ITS2 進(jìn)行測(cè)序,用于研究環(huán)境微生物中真菌群落結(jié)構(gòu)多樣性。
3、目標(biāo)區(qū)域擴(kuò)增子測(cè)序:根據(jù)客戶的研究需求,利用第二代高通量測(cè)序技術(shù),對(duì)某些目標(biāo)基因的 PCR 產(chǎn)物提供測(cè)序及分析服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)流程
分析內(nèi)容
樣品要求 Sample Requirements
送樣建議 | 送樣量 | 重復(fù)樣品數(shù) | DNA總量 | DNA濃度 | DNA純度A260/A280 | DNA完整性 | PCR 產(chǎn)物 | |
腸道樣品 | 糞便 | ≥1g,至少大于500mg | 10-20個(gè) | m≥0.25μg | c>5ng/μl | 1.8~2.0 | DNA無降解,即電泳有明顯的主條帶 | 濃度 ≥ 20 ng/μl,總量 ≥ 400 ng,片段大?。?nbsp;450 bp,條帶單一,無降解,無引物二聚體。 |
環(huán)境樣品 | 水體 | 50ml,推薦使用濾膜推注,2片以上 | 3-5個(gè) | |||||
土壤樣品 | 土壤、淤泥 | ≥50g | 10個(gè) |